半制備液相色譜儀的開機(jī)與系統(tǒng)自檢流程解析

半制備液相色譜儀使用工作過程  

1.開機(jī)準(zhǔn)備與系統(tǒng)自檢?  

電源啟動(dòng)順序：先開啟計(jì)算機(jī)電源，待系統(tǒng)穩(wěn)定后依次啟動(dòng)高壓輸液泵、柱溫箱、自動(dòng)進(jìn)樣器及檢測器，確保各模塊自檢完成。  

軟件聯(lián)機(jī)：雙擊色譜工作站，輸入用戶權(quán)限并選擇對應(yīng)的色譜系統(tǒng)，建立儀器方法組。  

2.流動(dòng)相配制與儀器沖洗?  

流動(dòng)相選擇與過濾：根據(jù)樣品性質(zhì)配制流動(dòng)相（需色譜級試劑），使用0.45μm或0.22μm濾膜過濾（有機(jī)相用有機(jī)濾膜，水相用水系濾膜）。  

泵排氣泡：將泵頭吸濾頭浸入流動(dòng)相，通過注射器抽液閥排空氣泡，設(shè)置流速3-5mL/min沖洗泵頭5分鐘，確保無氣泡殘留。  

進(jìn)樣針清洗：通過軟件控制自動(dòng)進(jìn)樣器進(jìn)行多次操作，或手動(dòng)用純甲醇沖洗注射器以去除氣泡。  

3.色譜柱平衡與基線監(jiān)測?  

平衡系統(tǒng)：設(shè)置初始流速和流動(dòng)相比例，運(yùn)行泵至壓力穩(wěn)定，通過工作站實(shí)時(shí)監(jiān)測基線，待基線平穩(wěn)后準(zhǔn)備進(jìn)樣。  

柱溫控制：若使用柱溫箱，需提前設(shè)置溫度（通常為室溫或根據(jù)方法要求），確保分離條件穩(wěn)定。  

4.樣品進(jìn)樣與分離?  

進(jìn)樣操作：將樣品溶解過濾后，通過自動(dòng)進(jìn)樣器或手動(dòng)進(jìn)樣閥注入樣品（典型進(jìn)樣量0.1-2000μL），設(shè)置保留時(shí)間并啟動(dòng)分離程序。  

梯度洗脫：若需梯度分離，通過軟件設(shè)置溶劑比例變化程序，動(dòng)態(tài)混合流動(dòng)相以實(shí)現(xiàn)高效分離。  

數(shù)據(jù)采集：檢測器實(shí)時(shí)采集信號（如紫外吸收或蒸發(fā)光散射信號），工作站生成色譜圖并記錄保留時(shí)間及峰面積數(shù)據(jù)。  

5.關(guān)機(jī)與系統(tǒng)維護(hù)?  

色譜柱清洗：  

若流動(dòng)相含緩沖鹽，先用高比例水（如90%水/10%有機(jī)相）沖洗1小時(shí)，再用純有機(jī)相（甲醇/乙腈）沖洗30分鐘，最后保存于純有機(jī)相中。  

無緩沖鹽時(shí)，直接用有機(jī)相沖洗30分鐘。  

儀器關(guān)機(jī)：停流速后關(guān)閉工作站，依次關(guān)閉檢測器、泵、柱溫箱及電源，最后關(guān)閉計(jì)算機(jī)。  

管路維護(hù)：長期停用時(shí)，管路需充滿純甲醇以防止溶劑揮發(fā)或污染。